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BibTeX
葡萄霜霉菌糖基水解酶基因的表达模式与功能分析
中国农业科学, 2023-03, Vol.56 (5), p.879-891
潘凤英
曲俊杰
刘露露
孙大运
郭泽西
韦晓丽
韦淑梅
尹玲
2023
Volltextzugriff (PDF)
Details
Autor(en) / Beteiligte
潘凤英
曲俊杰
刘露露
孙大运
郭泽西
韦晓丽
韦淑梅
尹玲
Titel
葡萄霜霉菌糖基水解酶基因的表达模式与功能分析
Ist Teil von
中国农业科学, 2023-03, Vol.56 (5), p.879-891
Ort / Verlag
广西壮族自治区农业科学院广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室,南宁530007
Erscheinungsjahr
2023
Quelle
EZB Electronic Journals Library
Beschreibungen/Notizen
[目的]克隆葡萄霜霉菌(Plasmopara viticola)糖基水解酶(glycosyl hydrolase,GH)基因(PvGH),分析其特征以及在葡萄霜霉菌侵染葡萄叶片过程中的表达模式,研究其抑制/促进烟草叶片程序性细胞死亡(PCD)以及影响烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)侵染的能力,为深入探究调控寄主植物免疫的机制提供理论依据.[方法]以葡萄霜霉菌Pv5-27菌株作为试材,采用RT-PCR方法扩增获得8个PvGH基因全长,并对其基因及编码蛋白进行生物信息学分析;利用酵母信号肽诱捕系统(SST)验证PvGH的分泌活性;利用实时荧光定量PCR技术检测葡萄霜霉菌侵染葡萄叶片过程中PvGH的表达模式;同时利用农杆菌介导的PVX病毒表达系统在本氏烟上瞬时表达PvGH效应蛋白,分析其对INF1和BAX触发的烟草PCD的抑制能力以及促进烟草疫霉侵染的能力.[结果]8个PvGH基因序列与通过全基因组预测的序列完全一致,长度为1 092-1 392 bp,分别编码364-464个氨基酸,与其他卵菌同源蛋白相似性高达60.62%-86.36%.8个PvGH均不含跨膜结构域,其二级结构差异较大,三级结构与其他蛋白三级结构相似性较低,呈现非常独特的三级结构.使用Singa1P 5.0软件对编码的蛋白进行信号肽预测,发现它们均含有20-26 aa的信号肽,但通过SST验证结果显示PvG09279和PvG13517并不具有分泌特性.保留、缺失或者替换信号肽的8个PvGH均可抑制BAX触发的本氏烟PCD,并促进烟草疫霉的侵染,表明PvGH效应蛋白发挥其毒力不依赖于信号肽.PvGH在葡萄霜霉菌侵染初期表达上调,进一步表明其在病原菌与寄主互作中的重要作用.[结论]在侵染寄主过程中,葡萄霜霉菌分泌的PvGH通过抑制寄主PTI反应参与致病过程.
Sprache
Chinesisch
Identifikatoren
ISSN: 0578-1752
DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2023.05.006
Titel-ID: cdi_wanfang_journals_zgnykx202305006
Format
–
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