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Autor(en) / Beteiligte

• 司马妮 王薇 徐茜 田训 罗爱月 卢运萍 王世宣 马丁

Titel

人乳头瘤病毒16型E6、E7反义RNA对人宫颈癌SiHa细胞的恶性逆转作用

Ist Teil von

• Ai zheng, 2007, Vol.26 (1), p.26-31

Ort / Verlag

华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤生物医学中心,湖北,武汉,430030

Erscheinungsjahr

2007

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Quelle

Alma/SFX Local Collection

Beschreibungen/Notizen

• 背景与目的：人乳头瘤病毒16型（human papillomavirus 16，HPV16）的早期基因E6、E7可分别诱导p53的泛素化降解和pRb的高磷酸化失活，与宫颈癌的发生发展关系密切。本研究通过真核表达载体介导HPV16型E6、E7基因反义RNA在SiHa细胞中的表达，探讨反义RNA能否降低E6、E7基因的表达和诱导细胞凋亡。方法：利用pEGFP构建HPV16型E6、E7基因反义RNA的真核表达载体并转染SiHa细胞。利用RT—PCR和Western blot技术检测转染后E6、E7基因的mRNA和蛋白的变化，利用MTT法检测SiHa细胞转染后细胞增殖活性，利用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测转染后细胞的凋亡情况。结果：转染携带HPV16型E6、E7反义基因的质粒后。SiHa细胞的E6、E7基因的mRNA和蛋白表达均明显下调；MTT结果显示转染后细胞的增殖活性（0．50±0．05）与转染空载体细胞（1．01±0．06）和未转染细胞（1．28±0．06）比较明显降低（P〈0．05）；流式细胞仪检测结果显示转染后细胞凋亡率（59．3±11．3）％与转染空载体细胞（9．4±1．8）％和未转染细胞（2．1±0．4）％比较有显著性差异（P〈0．05）。激光共聚焦显微镜结果示转染后细胞凋亡明显增多。结论：HPV16型E6、E7基因反义RNA可降低宫颈癌细胞中E6、E7癌基因的表达，诱导宫颈癌细胞凋亡。